{"id":1006,"date":"2019-07-03T21:17:07","date_gmt":"2019-07-03T19:17:07","guid":{"rendered":"http:\/\/gyneobs.com\/site\/?page_id=1006"},"modified":"2019-07-07T16:05:35","modified_gmt":"2019-07-07T14:05:35","slug":"la-vitrification","status":"publish","type":"page","link":"http:\/\/gyneobs.com\/site\/infertilite-et-procreation-medicalement-assistee\/cryoconservation\/la-vitrification\/","title":{"rendered":"La vitrification"},"content":{"rendered":"\n<h2 class=\"wp-block-heading\"><strong>D\u00e9finition-Technique<\/strong><\/h2>\n\n\n\n<div class=\"wp-block-image\"><figure class=\"alignright is-resized\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" src=\"http:\/\/gyneobs.com\/site\/wp-content\/uploads\/2019\/07\/Capture-d\u2019\u00e9cran-2019-07-07-\u00e0-16.03.42.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-2184\" width=\"322\" height=\"253\" srcset=\"http:\/\/gyneobs.com\/site\/wp-content\/uploads\/2019\/07\/Capture-d\u2019\u00e9cran-2019-07-07-\u00e0-16.03.42.png 503w, http:\/\/gyneobs.com\/site\/wp-content\/uploads\/2019\/07\/Capture-d\u2019\u00e9cran-2019-07-07-\u00e0-16.03.42-300x236.png 300w\" sizes=\"auto, (max-width: 322px) 100vw, 322px\" \/><\/figure><\/div>\n\n\n\n<p>La cryoconservation est devenue indispensable en biologie de la reproduction. Si la cong\u00e9lation du sperme et des embryons est utilis\u00e9e en routine depuis des ann\u00e9es dans les laboratoires d\u2019Assistance m\u00e9dicale \u00e0 la procr\u00e9ation (AMP), celle des ovocytes n\u2019est pas aussi d\u00e9velopp\u00e9e et pose encore des probl\u00e8mes d\u2019efficacit\u00e9 et d\u2019innocuit\u00e9. La cong\u00e9lation lente utilise une descente programm\u00e9e de la temp\u00e9rature dans des automates apr\u00e8s une exposition \u00e0 des cryoprotecteurs qui conduisent \u00e0 une d\u00e9shydratation cellulaire et limitent la formation de cristaux intracellulaires. Le r\u00e9chauffement est quant \u00e0 lui rapide, pour \u00e9viter les ph\u00e9nom\u00e8nes de recristallisation aux interfaces.<\/p>\n\n\n\n<p>La vitrification est une technique de refroidissement tr\u00e8s rapide. Elle conduit \u00e0 un \u00e9tat vitreux, solide mais non cristallis\u00e9, ce qui pr\u00e9vient les effets toxiques et osmotiques associ\u00e9s aux gradients de concentration induits par la cristallisation. Les param\u00e8tres qui gouvernent l\u2019obtention de l\u2019\u00e9tat vitreux sont la viscosit\u00e9 du milieu, obtenue gr\u00e2ce \u00e0 des solutions tr\u00e8s concentr\u00e9es de cryoprotecteurs, la vitesse \u00e9lev\u00e9e de refroidissement par immersion directe dans l\u2019azote liquide et le volume de l\u2019\u00e9chantillon qui doit \u00eatre minimis\u00e9.<\/p>\n\n\n\n<figure class=\"wp-block-image is-resized\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" src=\"http:\/\/gyneobs.com\/site\/wp-content\/uploads\/2019\/07\/Capture-d\u2019\u00e9cran-2019-07-07-\u00e0-16.01.04.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-2185\" width=\"644\" height=\"422\" srcset=\"http:\/\/gyneobs.com\/site\/wp-content\/uploads\/2019\/07\/Capture-d\u2019\u00e9cran-2019-07-07-\u00e0-16.01.04.png 928w, http:\/\/gyneobs.com\/site\/wp-content\/uploads\/2019\/07\/Capture-d\u2019\u00e9cran-2019-07-07-\u00e0-16.01.04-300x197.png 300w, http:\/\/gyneobs.com\/site\/wp-content\/uploads\/2019\/07\/Capture-d\u2019\u00e9cran-2019-07-07-\u00e0-16.01.04-768x503.png 768w\" sizes=\"auto, (max-width: 644px) 100vw, 644px\" \/><\/figure>\n\n\n\n<p>Les fortes concentrations de cryoprotecteurs n\u00e9cessaires pour la vitrification peuvent \u00eatre toxiques pour l\u2019ovocyte, voire s\u2019accompagner de fractures du milieu lors du refroidissement. Plusieurs cryoprotecteurs diffusibles et non diffusibles sont donc utilis\u00e9s en association, ce qui permet de r\u00e9duire la concentration de chacun d\u2019entre eux. La dur\u00e9e d\u2019exposition de l\u2019ovocyte aux solutions cryoprotectrices est r\u00e9duite pour limiter la toxicit\u00e9.<\/p>\n\n\n\n<p>La vitesse de refroidissement est essentielle. Les \u00e9changes thermiques sont aussi d\u00e9termin\u00e9s par le syst\u00e8me de contention de l\u2019ovocyte. L\u2019immersion directe d\u2019un corps chaud dans l\u2019azote liquide provoque une \u00e9bullition. La temp\u00e9rature d\u2019\u00e9quilibre de \u2013196\u00b0C est en effet maintenue gr\u00e2ce au refroidissement produit par l\u2019\u00e9vaporation d\u2019azote. Il en r\u00e9sulte la formation autour de l\u2019\u00e9chantillon d\u2019une couche isolante de vapeur d\u2019azote qui diminue la vitesse de refroidissement et peut compromettre la vitrification. R\u00e9aliser la proc\u00e9dure en d\u00e9pression permet d\u2019abaisser la temp\u00e9rature de l\u2019azote vers \u2212210\u00b0C (sous forme de neige) et d\u2019am\u00e9liorer la vitesse de refroidissement.<\/p>\n\n\n\n<p>Si la cong\u00e9lation embryonnaire est pratiqu\u00e9e depuis longtemps, plus r\u00e9cente est la vitrification qui donne d\u2019excellents r\u00e9sultats pour les blastocystes, les ovocytes f\u00e9cond\u00e9s (2 PN) et bien s\u00fbr les ovocytes. A. Cobo en 2011 avait repris la litt\u00e9rature sur cinq \u00e9tudes (Smith 2010, Rienzi 2010, Cao 2009 et Cobo 2008 et 2010) et montr\u00e9 sur 4 282 ovocytes vitrifi\u00e9s (syst\u00e8me Cryotop) les r\u00e9sultats en termes de survie et de grossesses, compar\u00e9s \u00e0 3 524 ovocytes frais et 361 ovocytes congel\u00e9s de mani\u00e8re lente. La survie ovocytaire apr\u00e8s vitrification\/d\u00e9cong\u00e9lation \u00e9tait de 92,5 \u00e0 97 %, sup\u00e9rieure \u00e0 ce qui \u00e9tait observ\u00e9 en cong\u00e9lation lente (OR : 2,46 ; IC 95 % : 1,82-3,32 ; p &lt; 0,00001). La f\u00e9condation de ces ovocytes vitrifi\u00e9s \u00e9tait \u00e9galement sup\u00e9rieure aux ovo- cytes congel\u00e9s lentement (OR : 1,5 ; IC 95 % : 1,07-2,11), mais identique aux ovocytes frais mis imm\u00e9diatement en f\u00e9condation. L\u2019obtention d\u2019embryons de bonne qualit\u00e9 \u00e9tait similaire apr\u00e8s vitrification et f\u00e9condation \u201cen frais\u201d, et les taux de grossesses cliniques, \u00e9volutives et les taux d\u2019implantation \u00e9taient comparables (vitrifi\u00e9s ver- sus frais), respectivement de 55,4 %, 49,1% et 40% vs 55,6%, 48,3% et 41 %. La question qui doit \u00eatre pos\u00e9e est son extension \u00e0 tous les autres embryons (J2 et J3)&nbsp;<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\"><strong><sup>Embryons et ovocytes<\/sup><\/strong><\/h2>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\"><sup>&nbsp;<\/sup><strong><sup>Concernant les embryons<\/sup><\/strong><\/h3>\n\n\n\n<p><sup>On peut leur appliquer la cong\u00e9lation lente ou la vitrification. La cong\u00e9lation a \u00e9t\u00e9 la premi\u00e8re technique&nbsp; de cnservation embryonnaire. La vitrification est aussi possible.&nbsp;<\/sup><\/p>\n\n\n\n<p>Le taux d\u2019\u2018implantation de l\u2019embryon apr\u00e8s une cong\u00e9lation lente tourne autour de 33%, tandis que la vitrification atteint des taux sup\u00e9rieurs \u00e0 50%.<\/p>\n\n\n\n<p>Les embryologues s\u2019accordent sur le fait que la vitrification d\u2019embryons fournit de bien meilleurs r\u00e9sultats que la cong\u00e9lation lente. Bien que les protocoles soient standardis\u00e9s, chaque entit\u00e9 commerciale propose le sien et chaque laboratoire a ses propres techniques pour obtenir de meilleurs r\u00e9sultats. En tout cas, la vitrification offre une meilleure efficacit\u00e9 tant au niveau de la survie des embryons qu\u2019au niveau du taux d\u2019implantation&nbsp; Cela se traduit donc par un meilleur pourcentage de grossesse compar\u00e9 aux m\u00e9thodes de cong\u00e9lation plus anciennes. En outre, cela permet de transf\u00e9rer moins d\u2019embryons et, de cette mani\u00e8re, de r\u00e9duire la probabilit\u00e9 de grossesses multiples.<\/p>\n\n\n\n<p>L\u2019\u00e9tat des embryons avant la cong\u00e9lation est basique, la vitrification ne peut se faire qu\u2019avec des embryons de bonne qualit\u00e9, autrement cela donnerait de faux espoirs aux couples puisque les embryons doivent \u00eatre suffisamment sains pour supporter tant le processus de cong\u00e9lation que de d\u00e9cong\u00e9lation, afin&nbsp;d\u2019arriver au transfert avec la meilleure garantie de r\u00e9ussite.<\/p>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\"><sup>&nbsp;<\/sup><strong><sup>Concernant les ovocytes<\/sup><\/strong><\/h3>\n\n\n\n<p><sup>La cong\u00e9lation des ovocytes est&nbsp; tr\u00e8sd\u00e9cevante. Par contre la vitrification des ovocytes donne de bons r\u00e9sultats.<\/sup><\/p>\n\n\n\n<p>Cette technique peut \u00e9galement servir aux femmes d\u2019\u00e2ge avanc\u00e9, qui repoussent la maternit\u00e9 ou qui souffrent d\u2019une faible r\u00e9ponse ovarienne et souhaitent accumuler des ovocytes pour un futur transfert. Quoiqu\u2019il en soit, la vitrification d\u2019ovocytes est plus complexe \u00e9tant donn\u00e9 qu\u2019il ne s\u2019agit pas uniquement d\u2019assurer la survie cellulaire mais aussi la pr\u00e9servation de son potentiel f\u00e9condateur. La vitrification a am\u00e9lior\u00e9 la cryoconservation d\u2019ovocytes qui constituera une solution possible dans un futur proche, mais il y a encore du chemin \u00e0 parcourir car les r\u00e9sultats ne sont toujours pas comparables \u00e0 ceux de la vitrification d\u2019embryons.<\/p>\n\n\n\n<p>Il n\u2019a pas \u00e9t\u00e9 observ\u00e9 d\u2019augmentation du risque d\u2019anomalies cong\u00e9nitales chez les quelques centaines d\u2019enfants n\u00e9s dans le monde apr\u00e8s cryoconservation ovocytaire&nbsp;Les couples qui le d\u00e9sirent sont dispens\u00e9s de r\u00e9pondre \u00e0 l\u2019inconfortable question de savoir s\u2019ils acceptent la cong\u00e9lation des embryons puisque la f\u00e9condation imm\u00e9diate de tous les ovocytes avant cryoconservation n\u2019est plus un passage oblig\u00e9.<\/p>\n\n\n\n<p>La pr\u00e9servation de la fertilit\u00e9 est \u00e9galement facilit\u00e9 par la vitrification ovocytaire.<\/p>\n\n\n\n<p>La vitrification ovocytaire apporte enfin une vraie r\u00e9ponse aux difficult\u00e9s du don d\u2019ovocyte .<br><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>D\u00e9finition-Technique La cryoconservation est devenue indispensable en biologie de la reproduction. 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